《微生物的实验室培养》导学案

约4230字。

第1课时　微生物的实验室培养
　　1.掌握培养基的配制、分装方法,简述有关培养基的基础知识。
　　2.说出灭菌和消毒的概念及两者的区别。
　　3.简述常用的消毒与灭菌方法。
　　4.掌握实验室灭菌方法及技术,进行无菌技术操作。
　　一、培养基
　　1.概念:人们按照微生物对①　营养物质　的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质叫培养基。可分为液体培养基和②　固体　培养基。
　　2.营养构成:各种培养基一般都含有水、③　碳源　、氮源和无机盐,此外还要满足微生物生长对④　pH　、特殊营养物质以及氧气的要求。
　　二、无菌技术
　　1.获得纯净培养物
　　(1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行⑤　清洁和消毒　。
　　(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行⑥　灭菌　。
　　(3)为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在⑦　酒精灯火焰　附近进行。
　　(4)实验操作时应避免⑧　已经灭菌　处理的材料用具与周围的物品相接触。
　　2.消毒和灭菌
　　(1)消毒是指使用较为⑨　温和　的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部⑩　一部分　对人体有害的微生物(不包括 　芽孢和孢子　)。常用的方法有 　煮沸　消毒法和巴氏消毒法。
　　(2)灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外 　所有　的微生物。常用的方法有:灼烧灭菌、干热灭菌、 　高压蒸汽　灭菌。
　　三、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
　　步骤:计算→称量→溶化→ 　灭菌　→倒平板。
　　四、纯化大肠杆菌
　　1.微生物接种最常用的是 　平板划线　法和 　稀释涂布平板　法。
　　2.平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步 　稀释分散　到培养基的表面。
　　3.稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的 　梯度稀释　,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。
　　1.微生物接种技术中最核心的内容是什么?用酒精擦拭实验者双手属消毒还是灭菌?70%与95%的酒精,哪一种效果更好?为什么?
　　2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。
　　(1)培养细菌用的培养基与培养皿。
　　(2)玻璃试管、烧瓶和吸管。
　　(3)实验操作者的双手。
　　3.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么?
　　知识点一:培养基
　　1.培养基的组成成分有哪些?你知道培养微生物时,除必需的营养成分外,还需要怎样的条件?
　　2.培养基的分类依据有哪些?分为哪些种类?
　　3.如何区分选择性培养基、鉴别培养基?分别有何作用?
　　4.配制培养基需要遵守哪些原则?
　　知识点二:无菌技术与大肠杆菌的纯化培养
　　1.什么叫无菌技术?如何理解消毒与灭菌?常见的消毒与灭菌方法有哪些?
　　2.请你为以下器皿或材料选择恰当的灭菌方法。
　　①微生物接种工具如接种环、接种针或其他金属用具、接种过程中试管口或锥形瓶口等;②玻璃器皿(如吸管、培养皿等)、金属用具等凡不适宜用其他方法灭菌而又能耐高温的物品;③普通培养基;④含有葡萄糖或氨基酸等不耐高温药品的培养基。
　　3.请列表比较纯化大肠杆菌的两种接种方法。
　　4.大肠杆菌接种操作成功的标准是什么?
　　5.怎样保藏菌种?
　　例1　 下列描述正确的是(　　)。
　　A.同一种物质不可能既作碳源又作氮源 　　　　　B.除水以外的无机物仅提供无机盐