《DNA的粗提取与鉴定》学案1

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约2980字。

　　课题1 DNA的粗提取与鉴定
　　课题目标
　　（一）知识与技能
　　1、通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取，了解DNA的物理化学性质。
　　2、理解DNA粗提取与鉴定的原理
　　（二）过程与方法
　　掌握DNA的提取方法，能利用DNA的性质进行实验设计和操作
　　（三）情感、态度与价值观
　　通过对DNA的粗提取的实验过程的设计及操作，锻炼科学的思维方法，培养实事求是的科学态度。
　　课题重点
　　DNA的粗提取和鉴定方法
　　课题难点
　　DNA的粗提取和鉴定方法
　　教学方法
　　启发式教学
　　教学工具
　　多媒体课件
　　教学过程
　　（一）引入新课
　　无论是果胶酶还是加酶洗衣粉中的酶制剂，都是从细胞中提取出来的。从今天开始，我们学习生物化学成分的提取与改造技术。
　　（二）进行新课
　　1．基础知识
　　1．1DNA粗提取的原理
　　提取DNA的原理包括DNA的溶解性和耐受性两个方面。问：提取DNA的溶解性原理包括哪些方面？
　　DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精。
　　1．1．1 分析图5－1。DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度有何特点？要使DNA溶解，需要使用什么浓度？要使DNA析出，又需要使用什么浓度？
　　在0.14mol/L时溶解度最小；较高浓度可使DNA溶解；0.14mol/L可使DNA析出。
　　1．1．2 在溶解细胞中的DNA时，人们通常选用2mol/LNaCl溶液；将DNA分子析出的方法是向溶有DNA的NaCl溶液中缓慢注入蒸馏水，以稀释NaCl溶液。酒精是一种常用有机溶剂，但DNA却不能溶于酒精（特别是95％冷却酒精），但细胞中蛋白质可溶于酒精。问：采用DNA不溶于酒精的原理，可以达到什么目的？
　　将DNA和蛋白质进一步分离。
　　1．1．3提取DNA还可以利用DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性原理。利用该原理时，应选用怎样的酶和怎样的温度值？
　　蛋白酶，因为酶具有专一性，蛋白酶只水解蛋白质而不会对DNA产生影响。温度值为60～80℃，因为该温度值蛋白质变性沉淀，而DNA不会变性。
　　补充：DNA的变性是指DNA分子在高温下解螺旋，其温度在80℃以上，如在PCR技术中DNA变性温度在95℃。
　　思考：观察图5-2，洗涤剂在提取DNA中有何作用？
　　洗涤剂将细胞膜上的蛋白质，从而瓦解细胞膜。
　　1．2DNA的鉴定原理
　　当鉴定提取出的物质是否是DNA时，需要使用什么指示剂进行鉴定？
　　在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺呈现蓝色。
　　原理总结。通过利用不同浓度NaCl溶液溶解或析出DNA，可以从细胞中提取和提纯DNA；再利用酒精进一步将DNA与蛋白质分离开来，达到提纯的目的；最后利用二苯胺试剂鉴定提取的物质是否是DNA。