《血红蛋白的提取和分离》学案

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约3550字。

　　课题3   血红蛋白的提取和分离
　　【课题目标】
　　本课题通过尝试对血液中血红蛋白的提取和分离，使学生能够体验从复杂体系中提取生物大分子的基本过程和方法，并了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理，为今后学习运用这些技术打下基础。
　　【课题重点与难点】
　　课题重点：凝胶色谱法的原理和方法。
　　课题难点：样品的预处理；色谱柱填料的处理和色谱柱的装填。
　　【导学诱思】
　　思考1：分离生物大分子的基本思路是什么？
　　思考2：蛋白质的分离和提取的原理是什么？
　　思考3： 高温灭菌和酒精灭菌分别利用蛋白质的何种作用，作用结果是什么被破坏？
　　思考4：人们用鸡的红细胞提取DNA，用人的红细胞提取血红蛋白的原因是什么？
　　一、基础知识：
　　㈠  凝胶色谱法（分配色谱法）：
　　1、概念：根据被分离蛋白质的                 ，利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用，来分离蛋白质的有效方法。
　　2、原理：当不同的蛋白质通过凝胶时，相对                                  的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程            ，移动速度                ，而                                的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在                 移动，路程           ，移动速度              ，相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离。
　　3、具体过程：
　　A.                   的蛋白质由于        作用进入凝胶颗粒内部而被滞留；                     的蛋白质被排阻在凝胶颗粒外面，在了里之间迅速通过。
　　B.（1）           混合物上柱；
　　（2）洗脱开始，                   的蛋白质扩散进入凝胶颗粒内；                     的蛋白质被排阻于凝胶颗粒之外；
　　（3）                 的蛋白质被滞留；                 的蛋白质被向下移动。
　　（4）                 不同的蛋白质分子完全分开；