《蛋白质的提取和分离》学案

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约3060字。

　　《蛋白质的提取和分离》学案
　　[课标要求]
　　尝试蛋白质的提取和分离
　　[知识梳理]
　　一．背景知识
　　1．常用的蛋白质分离提纯技术有                 和                    等。其中             技术最为快捷灵敏，简便易行。
　　2．电泳现象：                                                             。
　　3．电泳技术分离蛋白质的原理：                                           
　　。
　　4．聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）：                                            。
　　二．实践案例——血清蛋白的提取和分离
　　1．材料用具（略）
　　2．活动程序
　　（1）点样： 新配制血清5μL，与 质 量 浓 度 为0.4g/mL的 蔗 糖 溶 液 及 质 量 分 数为             的          指示剂等体积混匀后，用              加样器吸取5μL样品，小心加到电泳样品槽的胶面上。
　　（2）．电泳：打开稳压稳流电泳仪的电源，将电流调节至               mA，待样品进入分离胶后，改为               mA,当溴酚蓝前沿距离硅胶框下缘              时，将电流调回零。关闭电源。
　　（3）．染色：取出凝胶，放入质量分数为               的              中，染色与            同时进行，使染色液没过胶板，染色              。
　　（4）．脱色：用体积分数为                  的                 浸泡漂洗数次，每隔           更换脱色液，直至底色脱净，背景清晰。
　　（5）．烘干胶板：将已脱色的凝胶板放在保存液中浸泡              然后将凝胶板放在两层透气玻璃纸中间，自然干燥即可获得血清蛋白的电泳谱带。
　　3．结果分析
　　（1）分析没有出现电泳谱带的原因
　　（2）通过辨认电泳谱带可初步判断血清中蛋白质的种类
　　三．探究活动
　　1．牛奶中酪蛋白的提取和检测
　　提取原理：当pH=             时，酪蛋白的溶解度降低，并析出沉淀。用          除去酪蛋白中的脂肪后，即得到纯的酪蛋白。
　　检测原理：酪蛋白中的酪氨酸，能与               起颜色反应，首先生成白色沉淀，加热后变成               。
　　2．卵清蛋白的分离
　　用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术分离（同上）
　　四．意义
　　1．胰岛素的提纯
　　2．对细胞癌变做出诊断
　　[复习指导]
　　本节课复习以聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）为例，以电泳技术分离蛋白质的原理为基础，