《体外受精和早期胚胎培养》学案

约4430字。有限时训练。

　　专题3  胚胎工程
　　3.2  体外受精和早期胚胎培养
　　『课标解读』
　　1、知识方面
　　简述哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。
　　简述哺乳动物胚胎的早期培养方法。
　　2、情感态度与价值观方面
　　认同体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。
　　3、能力方面
　　能够使用通俗语言介绍体外受精何早期胚胎培养技术。
　　『网络构建』
　　试管动物技术：通过人工操作使卵子和精子在       条件下成熟和       ，并通过培养发育为早期胚胎后，
　　再经移植产生后代的技术。
　　方法一：用               处理，使其超数排卵，从中      冲取精子（针对
　　卵母细胞的              实验动物，家畜猪、羊等）
　　方法二：从屠宰母畜卵巢中采集
　　方法三：借助              、内窥镜、         等工具直接从       母畜
　　中吸取（针对大家畜或大型动物，如牛）
　　体外受精  卵母细胞的培养：在体外人工培养成熟
　　精子的采集：方法有               、手握法和电刺激法等
　　精子的    ：方法有培养法（通过获能培养液）、           法（通过肝素或钙离子载体A23187）
　　获能溶液或专用的受精溶液
　　受精：获能的精子 ＋培养成熟的卵子                              完成受精
　　胚胎早期培养  条件：受精卵在发育培养液中培养
　　培养液成分：无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、         等
　　答案：
　　体外 受精 采集 促性腺激素 输卵管 超声波探测仪 腹腔镜 活体 卵巢 假阴道法 获能 化学诱导 血清
　　『重难点归纳』
　　一、卵母细胞采集的方法和操作的要领是什么？
　　方法一：对实验动物小鼠、兔和小家畜猪、羊等卵母细胞采集时，可先用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，然后在适当的时间从输卵管冲取卵子，并使其直接与获能的精子在体外受精。方法二：从刚屠宰的雌性动物体内摘取卵巢，再从卵巢中采集卵母细胞。方法三：直接从活体动物的卵巢中采集卵母细胞，叫活体采卵。需借助超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜，直接从活的动物卵巢中吸取卵母细胞。后两种方法适用于大家畜和大动物。
　　注意：采集的卵母细胞需在体外培养成熟后才能与获能的精子受精。
　　二、如何选择用于体外培养的卵母细胞？
　　在选择卵母细胞时，无论用哪种方法采集到的卵母细胞，外围一般都应该有数层卵丘细胞所包围，形成一个叫卵丘复合体的结构（COC）。这种结构对于卵母细胞在体外条件下的成熟是十分重要的。在对家畜体外受精的操作中，一般把未成熟的卵母细胞分成A、B、C、D四级。对A级卵母细胞要求是有3层以上的卵丘细胞包围，卵母细胞的细胞质均匀；B级是少于3层卵丘细胞，但卵母细胞质要均匀；C级为没有卵丘细胞包围的卵母细胞，又称裸卵，培养效果很差；D级是退化或死亡的卵母细胞，应淘汰。A、B两类卵母细胞培养效果较好。
　　三、采集精子的方法有几种？各有什么具体要求？
　　主要分为假阴道法、手握法和电刺激法。假阴道法是用特制的假阴道，满足雄性动物交配时对压力、温度和润滑度的要求。同时要配备有与供精动物相适应的台畜，训练动物爬跨台畜，借假阴道收集精液。手握法是通过徒手或戴乳胶手套的手，直接把握雄性动物阴茎，施以适当压力和刺激即可引起射精，并可收集富含精子部分的精液。电刺激法是采用特制的电极伸入动物的直肠直接刺激位于腰荐部的射精中枢引起射精，此方法只适用于野生或某些经济动物。此外，对于啮齿类的实验动物可在处死后从附睾尾收集精液。
　　四、以牛为例，从屠宰场收集卵巢中的卵母细胞进行体外受精的应用效果如何？
　　目前，从屠宰场废弃的卵巢中，每个卵巢平均可采集10枚左右可用卵母细胞，经体外培养